主要的方法是:用添加剂和速冻,以防止冰晶的形成,即使形成,也是微小的冰晶,不致引起机械损伤。常用的添加剂是甘油和某些多元醇类化合物如甘醇等,其作用是使水不易结冰。速冻是将生物体在很短时间内,立即降至液态氮的温度(约为-195℃),使水迅速凝固,以避免形成冰晶。只用添加剂不能完全防止结冰;单靠速冻虽能避免在降温时形成较大的冰晶,却不能避免在温度回升时形成较大冰晶。只有两者适当结合,才能避免低温对生物体的损伤;冷冻干燥,即在凝固状态下,依靠真空干燥使水分升华,以防止因速冷而凝固的液体在温度回升时又形成冰晶。生物样品经冷冻干燥后在常温下即可储存,是一种较为理想的保存方法。但这种方法在温度过低时, 升华过慢, 温度偏高时又很难避免冰晶的形成,而且完全脱水也会给复杂的生物体带来某些不可恢复的损伤。因此只用于保存生物制品乳品、食品,以及菌种和---(见菌种保藏)等。
1、倾注平板法
首先把微生物悬液通过一系列稀释,取一定量的稀释液与熔化好的保持在40~50°左右的营养琼脂培养基充分混合,然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中,待凝固之后,把这平板倒置在恒箱中培养。单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落,取单个菌落制成悬液,重复上述步骤数次,便可得到纯培养物 2、涂布平板法
首先把微生物悬液通过适当的稀释,取一定量的稀释液放在无菌的已经凝固的营养琼脂平板上,然后用无菌的玻璃刀把稀释液均匀地涂布在培养基表面上,低温生物菌种,经恒温培养便可以得到单个菌落。3、平板划线法
简单的分离微生物的方法是平板划线法。用无菌的接种环取培养物少许在平板上进行划线。划线的方法很多,常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、四格法等。当接种环在培养基表面上往后移动时,接种环上的菌液逐渐稀释,然后在所划的线---散着单个细胞,低温生物菌种报价,经培养,每一个细胞长成一个菌落。
2、富集培养法
富集培养法的方法和原理非常简单。我们可以创造一些条件只让所需的微生物生长,在这些条件下,所需要的微生物能有效地与其他微生物进行竞争,低温生物菌种价格,在生长能力方面远---过其他微生物。所创造的条件包括选择合适的碳源、能源、温度、光、ph、渗透压和氢受体等。在相同的培养基和培养条件下,经过多次重复移种,然后富集的菌株很容易在固体培养基上长出单菌落。如果要分离一些专性寄生菌,就必须把样品接种到相应敏感宿主细胞群体中,使其大量生长。通过多次重复移种便可以得到纯的寄生菌。
石蜡油封存法,在斜面菌种培养物上,倒上灭菌后的石蜡油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低温干燥处保存,此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物,保存期为一年以上。
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