低温生物菌种报价-开碧源环境工程公司-低温生物菌种

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    2020-11-21

杨克敏
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低温生物菌种宝藏的目的

微生物在使用和传代过程中常常容易发生污染、变异甚至死掉的情况,因而常常造成菌种的衰变,并有可能使优良菌种丢失。因此菌种保藏的重要意义就在于尽可能的保持其原有性状和活力的稳定性,还有---菌种不死、不变异、不被污染,保持菌株优良性状不退化,保持优良菌株存活,以达到便于研究、交换和使用等诸方面的需要。




低温生物菌种的液氮冷冻保藏法

(1)准备安瓿管用于液氮保藏的安瓿管,要求---受温度突然变化而不致破碎,低温生物菌种,因此,需要采用硼硅酸盐玻璃制造的安瓿管,安瓿管的大小通常使用75×10mm的,低温生物菌种价格,或能容1.2mm液体的。

(2)加保护剂与灭菌保存---、酵母菌或霉菌孢子等容易分散的细胞时,则将空安瓿管塞上棉塞,1.05kg/cm2,121.3℃灭菌15分钟:若作保存霉菌菌丝体用则需在安瓿管内预先加入保护剂如10%的甘油蒸馏水溶液或10%二甲---蒸馏水溶液,低温生物菌种报价,加入量以能浸没以后加入的菌落圆块为限,而后再用1.05kg/cm2>;,121.3℃灭菌15分钟。

(3)接入菌种将菌种用10%的甘油蒸馏水溶液制成菌悬液,装入已灭菌的安瓿管;霉菌菌丝体则可用灭菌打孔器,从平板内切取菌落圆块,放入含有保护剂的安瓿管内,然后用火焰熔封。浸入水中检查有无漏洞。

(4)---再将已封口的安瓿管以每分钟下降1℃的慢速---至-30℃。若细胞急剧冷冻,则在细胞内会形成冰的结晶,因而降低存活率。

(5)保藏经---至-30℃的安瓿管立即放入液氮冷冻保藏器(图ⅶ-14)的小圆筒内,然后再将小圆筒放入液氮保藏器内。液氮保藏器内的气相为-150℃,液态氮内为-196℃。

(6)恢复培养保藏的菌种需要用时,将安瓿管取出,立即放入38-40℃的水浴中进行急剧解冻,直到全部融化为止。再打开安瓿管,将内容物移入适宜的培养基上培养。

此法除适宜于一般微生物的保藏外,对一些用冷冻干燥法都难以保存的微生物如支原体、衣原体、氢---、难以形成孢子的霉菌、噬菌体及动物细胞均可长期保藏,而且性状不变异。缺点是需要特殊设备。




 低温生物菌种贮存的方式

1.冷冻真空干燥法。将已培养、生长丰富的菌体或孢子悬浮于灭菌的、卵白、脱脂奶制成菌悬液,将悬液以无菌操作分装于灭菌的玻璃安瓿瓶中,每管约0.3-0.5毫升,然后用耐压橡皮管与冷冻干燥装置连接,安瓿瓶放在冷冻槽中于-30℃至-40℃迅速冷冻,并在冷冻状态下抽空干燥,并在真空状态下熔封安瓿,在-20℃保存,一般可保存十年以上,但成本较高。

  2.液氮---温保藏法。首先将要保藏的菌种制成菌悬液备用;其次,低温生物菌种厂家,准备安瓿瓶,每瓶加入0.8毫升冷冻保护剂10%(体积比)甘油蒸馏水溶液,塞棉塞灭菌(1公斤/平方厘米,5分钟)。无菌检查后,接入要保藏的菌种,火焰熔封瓶口,检查是否漏气,将封好口的安瓿瓶放在---器内,以每分钟下降1℃的速度缓慢降温,使保藏品逐步均匀地---,直至-35℃,以后---速度就不需控制,安瓿---后立即放入液氮罐内,在-150至-196℃保藏,该法只有少数科研院所使用。




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