低温生物菌种-低温生物菌种-开碧源(商家)

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    2020-11-17

杨克敏
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如何对微生物菌种进行活化

1 定期移植法的菌种复苏较简单,直接转接即可;

2 液体石蜡法保存的菌种在复苏时,挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上,生长繁殖后,再重新转接一次;

3  沙土管法保存菌种在复苏时,在无菌条件下打开沙土管,取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上,长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中,增殖培养后再转接斜面;

4  真空冷冻干燥法保存菌种在复苏时先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,将安瓿管顶部烧热, 用无菌棉签沾冷水,在顶部擦一圈,顶部出现裂纹,用挫刀或镊子颈部轻叩一下,敲下已开裂的安瓿管的顶端,低温生物菌种,用无菌水或培养液溶解菌块,使用无菌吸管移入新鲜培养基上,进行适温培养;

5  -80℃ 冰箱---法保存菌种复苏时,从冰箱中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动。直到内部结冰全部溶解为止,约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养

6  液氮---温---法保存菌种复苏与-80℃ 冰箱---法保存菌种复苏相似,从液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置在38℃-40℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止,一般约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养。



低温生物菌种的复壮定义

菌种的复壮(rejuvenation):使衰的菌种恢复原来优良性状。

狭义的复壮是指在菌种已发生衰的情况下,通过纯种分离和生产性能测定等方法,从衰的群体中找出未衰的个体,以达到恢复该菌原有典型性状的措施;

广义的复壮是指在菌种的生产性能未衰前就有意识的经常、进行纯种的分离和生产性能测定工作,以期菌种的生产性能逐步提高。实际上是利用自发突变(正变)不断地从生产中选种。




 低温生物菌种贮存的方式

1.冷冻真空干燥法。将已培养、生长丰富的菌体或孢子悬浮于灭菌的、卵白、脱脂奶制成菌悬液,将悬液以无菌操作分装于灭菌的玻璃安瓿瓶中,每管约0.3-0.5毫升,然后用耐压橡皮管与冷冻干燥装置连接,安瓿瓶放在冷冻槽中于-30℃至-40℃迅速冷冻,并在冷冻状态下抽空干燥,并在真空状态下熔封安瓿,在-20℃保存,一般可保存十年以上,但成本较高。

  2.液氮---温保藏法。首先将要保藏的菌种制成菌悬液备用;其次,准备安瓿瓶,低温生物菌种报价,每瓶加入0.8毫升冷冻保护剂10%(体积比)甘油蒸馏水溶液,塞棉塞灭菌(1公斤/平方厘米,5分钟)。无菌检查后,接入要保藏的菌种,火焰熔封瓶口,低温生物菌种多少钱,检查是否漏气,将封好口的安瓿瓶放在---器内,以每分钟下降1℃的速度缓慢降温,使保藏品逐步均匀地---,低温生物菌种,直至-35℃,以后---速度就不需控制,安瓿---后立即放入液氮罐内,在-150至-196℃保藏,该法只有少数科研院所使用。




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