微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。
低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。
保藏方法大致可分为以下几种:
1.传代培养保藏法
又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧---用),低温生物菌种价格,培养后于4—6℃冰箱内保存。
2.液体石蜡覆盖保藏法
是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,低温生物菌种,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种存活率,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
3.载体保藏法
是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,低温生物菌种公司,而后进行干燥的保藏法,低温生物菌种多少钱,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4.寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如---、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。---等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5.冷冻保藏法
可分低温冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、干冰酒精快速---(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6.冷冻干燥保藏法
先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。
即从生长有某种---的寄主体上(如茯苓、木耳木段)取下木片,进行分离的方法。如木耳制种时,可选朵大、出耳多、质厚的耳棒(即长有木耳的木段)。采集后,削去耳根下的树皮,将其横断面锯成1 厘米厚的木片,在无菌条件下,切去无耳菌丝部分,留下有耳菌丝部分,浸入0 . 1 %水中1 分钟,取出再用无菌水冲去木片上的液。然后,用解剖刀将木片切成0 . 5 厘米的小块,放入斜面培养基内,置24 ~26 ℃下培养,及时淘汰杂菌,选取纯菌丝进行移植培养,即得菌种。
保藏可按微生物各分支学科的性质分为普通﹑工业﹑农业﹑医学﹑兽医﹑等保藏管理中心。此外﹐也可按微生物类群进行分工﹐如沙门氏菌﹑弧菌﹑根瘤菌﹑乳酸菌﹑酵母菌﹑丝状---﹑藻类等保藏中心。
上约有 550个菌种保藏机构。其中有美国典型菌种保藏中心(简称---c﹐马里兰)﹕1925年建立﹐是上大的﹑保存微生物种类和数量多的机构﹐保存---﹑衣原体﹑---﹑酵母菌﹑---﹑藻类﹑原生动物等约 29000株﹐都是典型株﹔荷兰---菌种保藏中心(简称cbs﹐得福特):1904年建立﹐保存酵母菌﹑丝状---约 8400种﹑18000株﹐大多是模式株﹔英国全国菌种保藏中心(简称nctc﹐伦敦)﹕保存兽用病原微生物约2740株﹔英联邦---研究所(简称cmi﹐萨里郡)﹕保存---模式株﹑生理生化和有机合成等菌种2763种﹐8000株﹔日本大阪发酵研究所(简称ifo﹐大阪):保存普通和工业微生物菌种约9000株﹔美国相关部北方利用研究开发部(北方地区研究室﹐简称nrrl﹐伊利诺伊州皮契里亚)﹕收藏农业﹑工业﹑微生物分类学所涉及的菌种﹐包括---5000株﹐丝状---1700株﹑酵母菌6000。
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