微生物在使用和传代过程中常常容易发生污染、变异甚至死掉的情况,低温生物菌种公司,因而常常造成菌种的衰变,并有可能使优良菌种丢失。因此菌种保藏的重要意义就在于尽可能的保持其原有性状和活力的稳定性,还有---菌种不死、不变异、不被污染,保持菌株优良性状不退化,保持优良菌株存活,以达到便于研究、交换和使用等诸方面的需要。
1 沙土管制备
将河沙用60目过筛,弃去大颗粒及杂质,再用80目过筛,去掉细沙。用吸铁石吸去铁质,放入容器中用10%---浸泡,如河沙中有机物较多可用20%---浸泡。24小时后倒去---,用水洗泡数次至中性,将沙子烘干或晒干。另取地面下40~60cm非耕作层贫瘠且粘性较小的土,研碎,低温生物菌种价格,100目过筛,水洗至中性,烘干。将处理后的沙、土按比2∶1混合。混匀的沙土分装入安瓿管或小试管中,高度为1cm左右,低温生物菌种多少钱,塞好棉塞,121℃湿热灭菌30min。随机抽取灭菌后的砂土管若干支,无菌条件下取少许砂土至营养肉汁培养基中,30℃培养24小时,低温生物菌种,检查无微生物生长后方可使用。
2 斜面培养物的制备
参照定期移植法。
3 制备菌悬液
向培养好的斜面培养物中注入3~5ml无菌水,洗下细胞或孢子制成菌悬液。用无菌吸管吸取菌悬液,均匀滴入沙土管中,每管0.2~0.5ml。霉菌可直接挑取孢子拌入沙土管中。
4 干燥
真空抽去沙土管中水分。
5 保藏
将沙土管用火焰熔封后存放于低温(4~6℃)干燥处保藏,每隔半---查一次菌种存活性及纯度。或将沙土管直接用牛皮纸或塑料纸包好,置干燥器内保存。
保藏时间2~10年。
6 恢复培养
无菌条件下打开沙土管,取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上,长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中,增殖培养后再转接斜面。
菌种保藏(culture preservation,culture collection)是指保持微生物菌株的生活力和遗传性状的技术。或经人工选育得到的变异型纯种,使其存活、不丢失、不污染杂菌、不发生或少发生变异,保持菌种原有的各种特征和生理活性。基本原理是使微生物的生命活动处于休眠状态,也就是使微生物的---作用---在低范围内。干燥、低温和隔绝空气是---获得这种状态的主要措施。有针对性地创造干燥、低温和隔绝空气的外界条件,就是微生物菌种保藏的基本技术。常用的方法有冻干保藏法、深低温保藏法、液氮保藏法、矿油封藏法、固体曲保藏法、砂土管保藏法、琼脂穿刺保藏法等。日常工作中,常选用4℃冰箱进行短时间的菌种保藏
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