1.冷冻真空干燥法。将已培养、生长丰富的菌体或孢子悬浮于灭菌的、卵白、脱脂奶制成菌悬液,将悬液以无菌操作分装于灭菌的玻璃安瓿瓶中,每管约0.3-0.5毫升,然后用耐压橡皮管与冷冻干燥装置连接,安瓿瓶放在冷冻槽中于-30℃至-40℃迅速冷冻,并在冷冻状态下抽空干燥,并在真空状态下熔封安瓿,在-20℃保存,一般可保存十年以上,但成本较高。
2.液氮---温保藏法。首先将要保藏的菌种制成菌悬液备用;其次,准备安瓿瓶,每瓶加入0.8毫升冷冻保护剂10%(体积比)甘油蒸馏水溶液,塞棉塞灭菌(1公斤/平方厘米,低温生物菌种,5分钟)。无菌检查后,接入要保藏的菌种,火焰熔封瓶口,检查是否漏气,将封好口的安瓿瓶放在---器内,以每分钟下降1℃的速度缓慢降温,使保藏品逐步均匀地---,直至-35℃,以后---速度就不需控制,低温生物菌种厂家,安瓿---后立即放入液氮罐内,在-150至-196℃保藏,该法只有少数科研院所使用。
生物有机肥产品生产菌种使用现状
---类生产用菌种除常见的芽孢外, 还出现了高地芽孢菌、 类干酪乳菌、 屎肠球菌、 盐居固氮菌等新菌种, 其中, 高地芽孢菌和盐居固氮菌普遍存在于土壤环境中, 未见致病性---, 属风险一级; 类干酪乳菌又名为副干酪乳菌, 虽为风险一级 , 但有从动物---部位分离到该菌的---;屎肠球菌属于乳酸菌类,属风险二级, 建议谨慎使用。伯克霍尔德氏菌是一些具有生物---、 促进植物生长和生物修复等功能的---, 但同时也是可以引起鼻疽、 类鼻疽病的致病菌, 因此---伯克霍尔德氏菌属于风险三级, 需做致病性试验, 建议慎用或不用。---类生产用菌株主要为丝状---和酵母菌。哈茨木霉、 米曲霉、 淡紫紫孢菌、 长枝木霉、 绿色木霉、 棘孢木霉、 黑曲霉、 粉红螺旋聚孢霉、 金龟子绿僵菌等属于生物安全风险等级二级,低温生物菌种价格, 需按照ny/t 1109-2017 <微生物肥料生物安全通用技术准则> 进行毒理学测试。酵母菌主要以酿酒酵母为主, 还有少量东方伊萨酵母、杰丁塞伯林德纳氏酵母 (原产朊假丝酵母、 杰丁毕赤酵母)、 膜醭毕赤酵母、 解脂耶罗威亚酵母等, 属于生物安全风险等级一级, 可免做毒理学试验。
实验室菌种的传代保藏过程
1. 按菌种说明书要求复溶菌粉,转种于适当的增菌培养基内(g1),复壮后转接至平板上,并于适当温度下培养适当时间,分离出单个纯种菌落,此为第2代(g2)。
2. 菌种鉴定完成后,挑取纯菌落制成浓菌悬液用于制备甘油冷冻管,同时挑取纯菌落转接斜面菌种作为工作用菌种。此时,保藏菌种为第2代,低温生物菌种,但工作用菌种则为第三代。
3. 将第2代菌种管冷冻保存,将工作用菌种于适当温度下培养适当时间后可用于试验。
4. 取一支冷冻保存的g2代菌种转种于平板和斜面培养基上,平板上的菌种制成冷冻保藏管第三代(g3),斜面培养基经适当温度下培养适当时间后用作工作用菌种(w3)。
5. 将第三代菌种(g3)冷冻或低温保存,将生长、转种后的g2菌种经灭菌处理后丢弃。
6. 当工作用菌种代数小于5时,可直接用上一代工作用菌种转接下一代工作用菌种,如w3可直接转接为w4。
7. 按上述程序操作,直至g4转为w5为止,需重新开启安瓿,再重复上述操作程序、保藏和使用菌种。
以上方法中,菌种被分为两类。传代用菌种和工作用菌种,传代用菌种用于甘油冷冻管法保藏,工作用菌种用斜面低温保藏法保藏。
实验证明,甘油冷冻管的有效期至少为2年,但其主要适用于---(需氧)、酵母菌的传代、保藏、---和芽孢类---则需应用其它方法。
低温生物菌种-开碧源(在线咨询)-低温生物菌种由北京开碧源环境工程有限公司提供。北京开碧源环境工程有限公司是北京 北京市 ,其它的企业,多年来,公司贯彻执行科学管理、---发展、诚实守信的方针,满足客户需求。在开碧源---携全体员工热情欢迎---垂询洽谈,共创开碧源美好的未来。
联系我们时请一定说明是在100招商网上看到的此信息,谢谢!
本文链接:https://tztz322540a1.zhaoshang100.com/zhaoshang/218189240.html
关键词: