1 沙土管制备
将河沙用60目过筛，弃去大颗粒及杂质，再用80目过筛，去掉细沙。用吸铁石吸去铁质，低温生物菌种价格，放入容器中用10%---浸泡，如河沙中有机物较多可用20%---浸泡。24小时后倒去---，用水洗泡数次至中性，将沙子烘干或晒干。另取地面下40～60cm非耕作层贫瘠且粘性较小的土，低温生物菌种，研碎，100目过筛，水洗至中性，烘干。将处理后的沙、土按比2∶1混合。混匀的沙土分装入安瓿管或小试管中，高度为1cm左右，塞好棉塞，121℃湿热灭菌30min。随机抽取灭菌后的砂土管若干支，无菌条件下取少许砂土至营养肉汁培养基中，30℃培养24小时，检查无微生物生长后方可使用。
2 斜面培养物的制备
参照定期移植法。
3 制备菌悬液
向培养好的斜面培养物中注入3～5ml无菌水，洗下细胞或孢子制成菌悬液。用无菌吸管吸取菌悬液，均匀滴入沙土管中，每管0.2～0.5ml。霉菌可直接挑取孢子拌入沙土管中。
4 干燥
真空抽去沙土管中水分。
5 保藏
将沙土管用火焰熔封后存放于低温(4～6℃)干燥处保藏，每隔半---查一次菌种存活性及纯度。或将沙土管直接用牛皮纸或塑料纸包好，置干燥器内保存。
保藏时间2～10年。
6 恢复培养
无菌条件下打开沙土管，取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上，长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中，增殖培养后再转接斜面。
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