微生物对温度的要求不同与它们的膜结构物理化学性质有密切关系 根据细胞膜的液体镶嵌模型,细胞在正常生理条件下,膜中的脂质成分应保持液晶状态,只有当细胞膜处于液晶状态,低温生物菌种,才能维持细胞的正常生理功能,使细胞处于生长状态微生物的生长温度与细胞膜的液晶温度范围相一致。
通过对嗜冷酶的蛋白质模型和x一射线衍射分析表明,嗜冷酶分子间的作用力减弱,与溶剂的作用加强,酶结构的柔韧性增加,使酶在低温下容易被底物---产生催化作用。
2、蛋白质合成
3、合成冷蛋白
低温微生物适应低温的另一机制是合成冷休蛋白 将大肠菌从370c突然转移到100c条件时细胞中会---合成一组冷休蛋白,它们对低温的生理适应过程中发挥着重要作用,检测嗜冷酵母的冷休反应,低温生物菌种多少钱,发现冷---后冷休蛋白在很短时间内大量产生。 耐冷菌由于生活在温度波动的环境中,它们必须忍受温度的快速降低,这与它们产生的冷休蛋白是密切相关的。
1 沙土管制备
将河沙用60目过筛,弃去大颗粒及杂质,低温生物菌种,再用80目过筛,去掉细沙。用吸铁石吸去铁质,放入容器中用10%---浸泡,如河沙中有机物较多可用20%---浸泡。24小时后倒去---,用水洗泡数次至中性,将沙子烘干或晒干。另取地面下40~60cm非耕作层贫瘠且粘性较小的土,研碎,100目过筛,水洗至中性,烘干。将处理后的沙、土按比2∶1混合。混匀的沙土分装入安瓿管或小试管中,高度为1cm左右,塞好棉塞,121℃湿热灭菌30min。随机抽取灭菌后的砂土管若干支,无菌条件下取少许砂土至营养肉汁培养基中,30℃培养24小时,检查无微生物生长后方可使用。
2 斜面培养物的制备
参照定期移植法。
3 制备菌悬液
向培养好的斜面培养物中注入3~5ml无菌水,洗下细胞或孢子制成菌悬液。用无菌吸管吸取菌悬液,均匀滴入沙土管中,每管0.2~0.5ml。霉菌可直接挑取孢子拌入沙土管中。
4 干燥
真空抽去沙土管中水分。
5 保藏
将沙土管用火焰熔封后存放于低温(4~6℃)干燥处保藏,每隔半---查一次菌种存活性及纯度。或将沙土管直接用牛皮纸或塑料纸包好,低温生物菌种报价,置干燥器内保存。
保藏时间2~10年。
6 恢复培养
无菌条件下打开沙土管,取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上,长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中,增殖培养后再转接斜面。
研究在低温条件下生命活动的生物化学规律的新兴学科,是低温生物学的重要基础。例如,在某些冬眠状态的昆虫---中,甘油含量可---25%,以致在-35℃的状况下也不会冰冻。另一方面,利用低温下变化减慢,来研究在常温下变化较快的一些生物化学反应。如在酶的催化、蛋白质和---在溶液中的空间构象变化中。某些中间变化常温下在千分之一秒的时间内即可完成,用一般方法难以探讨,而在含有添加剂使温度降至-40℃左右的溶液中,反应速度大为减慢就可用常规方法进行研究。
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