菌种保藏有多种方法,其原理大多大同小异,主要是运用一些方式尽量降低生物体内的代谢,低温生物菌种,达到延长生命,减少变异的目的。通常采用的方法为低温、缺氧、干燥。
低温主要对菌种产生两方面的影响,首先,低温生物菌种厂家,较低的温度可以减缓机体细胞的酶活,降低---,达到保藏菌种的目的。其次,低温同时会导致菌体诱发菌丝自溶机制,如果降温过程失误,同样会造成机体的机械损伤和溶质损伤。
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,低温生物菌种,必须使微生物的代谢处于不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。
低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。
低温生物菌种都是需要保护剂的,动物细胞也可以。---结构问题使得它比较容易保存,只用加10%左右的甘油就可以在-20摄氏度保存。动物细胞需要加dmso等,并且需要放到-80或者液氮才行冷冻保藏是指将菌种于-20℃以下的温度保藏,通过冷冻,使微生物代谢活动停止。就是通过低温来抑制微生物的生命活动,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素。
菌的:保藏的菌种应培养在营养丰富的条件下,使之进入稳定期,稍老一些的菌体对环境抵抗力强。另处,作为冷冻干燥的菌悬液细胞浓度要高不同的菌对冷冻干燥的耐受程度不同,如果保存的菌液细胞浓度不高,就会使以后传种造成困难,保存期也会受到影响。
保护剂:不同种类的保护剂对不同微生物的作用是不同的,如个别菌种在脱脂乳作保护剂的情况下失败率---99.99%,而采用葡聚糖等混和保护剂时失败率---减少。一般情况下,那些容易保存的菌种对保护剂的要求不很严格,而不易保存的菌种对保护剂的要求却很苛刻。因此,选择好的保护剂是冷冻干燥保存菌种的关键因素。
干燥速度:实验表明,慢速干燥比快速干燥存活率高,如青霉菌6h干燥存活率为67.3%,而3h为59%。
空气的影响:冷冻干燥后空气对---细胞影响较大,可导致细胞损伤进而失败,故在冻干后应立即在真空下融封,才有利于长期保存。
温度的影响:在干燥和真空状况下温度的影响远没有上述几项因素重要,因此可以在室温下保存,低温生物菌种多少钱,但许多微生物在4℃保存的存活率要比在室温下高1倍。
含水量的影响:水分含量过高对菌存活不利,完全脱水也不利于保存,一般把干燥后的细胞含水量控制在3%以下(1%-3%)
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